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Western Blot快速转膜液(20X)简介

更新时间:2022-07-19 点击量:4473

Western Blot Rapid Transfer Buffer

(20X)

Catalog Number:ED510


 

01/产品概


立谱沃生物的Western Blot快速转膜液(20X),即Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X),是一种20倍浓缩的安全无毒害的用于Western Blot实验的快速湿转缓冲液。本产品采用全新的快速转印配方,15-30 min即可高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。本产品为20倍浓缩(20X)溶液,使用前需要用适当水和乙醇稀释至1X。配制过程中可用无水乙醇替代甲醇,无需使用剧毒的甲醇等试剂安全无毒害转膜全程产热小,无需外置冰浴。



 

 

02/产品组分


组分

ED510

Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X)

500 mL

 

 



03/保存条件


常温运输。室温干燥处保存,有效期12个月。



 

 

04/产品特点


1. 转印快速、高效——500mA恒流转膜15-20分钟或400mA恒流转膜约20-30分钟即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至印迹膜上转膜效果好。

2. 无需外置冰浴,仅使用内置冰盒即可——转膜过程产热非常小,无需外置冰浴,减少蛋白损失相同的条件下使用传统的转膜液更容易导致过度发热,而在发热程度相似的情况下传统转膜液需要转膜更长时间。

3. 使用安全——可用无水乙醇替代甲醇,选择灵活,可避免使用有毒的甲醇等试剂



 

 

05/适用范围


Western Blot快速转膜液(20X)适用于Western Blot湿转法转膜。兼容各种常见凝胶,例如Laemmli胶、预制胶、FastPAGE、Bis-Tris胶等。



 

 

06/使用说明


一、Western Blot快速转膜液(1X) 1000 mL的配制方法:

取Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) 50mL加入850 mL超纯水中,加入100 mL 无水甲醇(或无水乙醇),混匀,4℃保存备用。


二、参考转膜条件:

根据实验条件及仪器的不同,转膜条件会有差别。通常条件下,转膜电流可设置为电泳仪允许的最大电流。具体转膜条件可根据电泳仪电流限定、凝胶厚度、分离胶浓度、目的蛋白分子量做出适当调整。参考转膜条件如下:

 

1. 梯度胶

浓度4%~15%,厚度0.75 mm,恒流400 mA,30 min以内所有条带均可完成转膜。

 

2. 普通PAGE胶

转膜效率与分离胶浓度及厚度有关,对于各浓度1.0 mm 凝胶,采用恒流400 mA,按如下时长即可将150 kDa 以下蛋白转印*,若蛋白分子量大于150 kDa,需延长转膜时间5-10 min。


分离胶浓度

6%

7.5%

10%

12.5%

推荐转膜时间

20 min

25 min

30 min

35 min

Ø PAGE胶厚度越厚,转膜效率越低。对于厚度1.5 mm的凝胶,可将上表推荐的转膜时间相应延长5-10 min。



 

 

07/注意事项


1. PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿30秒以上进行活化。

2. 转膜液稀释为1x后请尽快使用,应避免长时间存放于室温,短期内保存建议放置于4℃冰箱。

3. 转膜时,如果出现报错而停止,需要根据情况查看是否是电压或电流过载、转膜液过多或过少、转膜槽短路或断路等异常情况。

4. 回收的转膜液可重复使用1-2次,但为取得更好的转膜效果,不建议多次重复使用,以免影响转膜效率。

5. 为了您的健康安全,请规范操作,穿戴实验服与手套开展实验。

6. 本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及治疗。



 

 

08/其他相关产品


产品名称

货号

规格

Western Blot CBB Protein Safe Stain Solution (Decolorization Free, 1X)

ED410-1

100 mL

ED410-5

500 mL

Western Blot Rapid Blocking Buffer 

(Protein Free, 1X)

ED610-1

100 mL

ED610-5

500 mL

Western Blot Stripping Buffer (1X)

ED710-1

100 mL

ED710-5

500 mL

Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer (1X)

ED810-1

100 mL

ED810-5

500 mL

Western Blot Ultra Sensitive 

ECL Chemiluminescent Substrate Kit

ED910-1

100 mL

ED910-5

500 mL