1-10
基因干扰慢病毒是一种特殊的病毒载体,用于实现基因干扰(RNA干扰,RNAi)技术。慢病毒:慢病毒是一种有包膜的RNA病毒,直径为80~120nm,呈二十面体对称结构、球形。它属于逆转录病毒的一种,但具有更广的宿主范围,对分裂细胞和非分裂细胞...
12-10
过表达慢病毒是一种基于慢病毒载体的基因传递系统。慢病毒是一类单链RNA病毒,其基因组可以整合到宿主细胞的染色体上,从而实现长期稳定的基因表达。通过将目的基因克隆到慢病毒载体中,利用慢病毒的包装质粒和辅助质粒共同转染到包装细胞中,经过包装、成...
11-11
慢病毒包装试剂盒通常包含优化的慢病毒包装辅助质粒混合物、表达特定标记蛋白(如eGFP)的对照质粒以及高效转染试剂。这些组件共同协作,能够表达出病毒包装所需的各种必需成分,如gag基因(编码病毒主要的结构蛋白)、pol基因(编码病毒特异性的酶...
10-21
蛋白转染是一种将外源蛋白质导入细胞的技术,广泛应用于生物学研究和基因治疗领域。1.定义:将外源蛋白质或其编码的DNA序列导入到宿主细胞中,使该细胞能够表达和产生相应的蛋白质。2.方法:常见的方法包括化学法、电穿孔法、脂质体介导法和病毒载体法...
9-12
核酸转染试剂通常包括载体、辅助剂和缓冲液等成分。其中,载体是用于将DNA或RNA包裹起来并保护其免受降解的物质。辅助剂则可以帮助载体进入细胞内部,并促进其与细胞膜的结合。缓冲液则用于调节pH值和离子浓度,以维持细胞的正常生理状态。在进行核酸...
8-15
在现代生命科学领域中,基因干扰技术已经成为了一种重要的分子生物学工具,它通过特定的方法抑制或调节基因的表达,为研究基因功能、治疗疾病以及生物技术应用提供了新的可能性。基因干扰的核心机制是RNA干扰(RNAi)。这种现象在植物和线虫中发现,后...
7-17
基因过表达是现代分子生物学研究中的一项重要技术,它涉及将特定基因在目标生物体内高水平表达,以便研究该基因的功能和调控机制,或用于生产大量的蛋白质等。基因过表达通常涉及以下几个关键步骤:选择目标基因并复制其DNA序列;其次,将这段基因序列插入...
3-18
慢病毒包装细胞系是一种理想的工具,可用于实现有效的基因传递和表达,具有广泛的应用前景。随着慢病毒包装技术的广泛应用,选择适合自己研究需要的细胞系变得至关重要。是用于生产慢病毒载体的特殊细胞系。慢病毒是一类能够稳定整合到宿主基因组中的病毒,可...
2-1
慢病毒浓缩试剂的原理基于离心浓缩、冻融循环和沉淀洗涤的方法。首先,将含有慢病毒的培养液通过离心操作进行初步浓缩,去除大部分细胞残渣和杂质。接下来,将浓缩后的慢病毒溶液冻结,并迅速解冻,形成冻融循环。这个过程会导致慢病毒表面的脂质包膜破裂,释...
1-4
稳定细胞株是指具有长时间传代稳定转基因表达的细胞系,其原理主要包括两个方面:转染外源DNA和筛选稳定转染细胞。稳定细胞株的建立需要将外源DNA转染到目标细胞中。目前常用的转染方法有瞬时转染和稳定转染两种。瞬时转染主要通过电转、化学转染或病毒...