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Western Blot快速封闭液(1X) ED610使用说明

更新时间:2022-08-24 点击量:653
  Western Blot快速封闭液(1X) ED610总体效果优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品,主要用于Western blot(WB)实验中PVDF膜或硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane,NC膜)的封闭,也可以用于Western实验中一抗或二抗的稀释。封闭液快速。封闭时间通常仅需5-15分钟,并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统的Western封闭液以及国外同类的快速封闭液相比,显示出更强的信噪比。封闭后背景低且不含血清和白蛋白,确保信噪比。
 
  Western Blot快速封闭液(1X) ED610使用说明:
 
  1.完成转膜后,用Western洗涤液洗涤印迹膜1-2分钟。
 
  2.根据膜的大小,在平皿或者其它适当容器中倒入一定体积的封闭液,确保封闭液后续能充分覆盖膜即可。对于常规的western,一张约6.6×8.5cm的膜推荐使用约10ml左右的封闭液。
 
  3.用平头镊夹住膜的一角,将膜放置在封闭液中,使封闭液*浸没膜,置于水平摇床上封闭约10分钟(通常5-15分钟均可;经多种抗体的测试封闭10分钟的效果很多时候会显著优于常规的BSA封闭1小时的效果)。
 
  4.封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。
 
  Western Blot快速封闭液(1X) ED610用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外,如有特殊需要,也*可以4C封闭过夜。由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的,因此对于一些特殊的实验,可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。