当前位置:网站首页技术文章 > LeapWal 无血清细胞冻存液 PZ110R 细胞复苏过程

LeapWal 无血清细胞冻存液 PZ110R 细胞复苏过程

发布时间:2022-09-20 点击量:102
  LeapWal 无血清细胞冻存液 PZ110R含多种保护剂成分,一些保护剂,易于穿透细胞,避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞,同时另一些保护剂不能穿透细胞,但可以在冰晶形成之前,优先结合细胞外的水分子,降低细胞外溶液的电解质浓度,减少阳离子进入细胞的数量,我公司无血清细胞冻存液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,大大提高了细胞复苏存活率。
 
  LeapWal 无血清细胞冻存液 PZ110R细胞复苏过程:
 
  (1)提前开启水浴锅,温度调节到37度。轻轻的晃动冻存管,注意管内冻存细胞的融化情况。当管内的冰核还有黄豆大小的时候,取出来,用酒精棉擦拭管体,转移到超净工作台内。
 
  注意:这一步对细胞存活率至关重要。既要尽快融化,以减少融化过程对细胞的损害;又要尽可能减少细胞在较高温度停留的时间,以减少DMSO对细胞的毒害。切不可将冻存管放在水浴锅内不管。
 
  (2)将冻存的细胞冷冻管从液氮中取出,迅速置于水浴锅中融化,尽量1min融化,时间越短,对细胞影响越小。
 
  (3)打开冻存管管盖。轻柔的将冻存管内的细胞悬液(约1mL)吸取出来,转移到一个预冷的15mL离心管内。缓慢加入10mL细胞培养基(4℃),边加边轻摇混匀,滴加完之后盖上管盖,轻轻地上下颠倒混匀。将融化后的含细胞的冷冻保存液迅速析出置于新鲜培养基中充分混匀,(如细胞冷冻保存液为500ul,则加入到5ml新鲜培养基中,如细胞冷冻保存液位1ml,则加入10ml新鲜培养基中。)
 
  (4)混匀后立即离心,800转,3min即可,离心结束后弃上清,加入预温的新鲜培养液。
 
  (5)混匀后分瓶置于二氧化碳培养箱中培养。(二氧化碳浓度根据培养基要求决定,通常为5%)。
在线咨询
咨询热线

18478886838

[关闭]