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AV3 人宫颈癌细胞

简要描述:AV3 人宫颈癌细胞
(Human Cervical Cancer Cells)
收到细胞后,请检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损、干冰已完*挥发等问题,请立即
拍照,并即时联系工作人员处理。

  • 产品型号:CL020005
  • 产品价格:1800¥
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-03-27
  • 访  问  量:325
详细说明:

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AV3 人宫颈癌细胞

(Human Cervical Cancer Cells)



AV3 人宫颈癌细胞

一、T25 细胞收到后处理

1、观察

细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满完*培养基并密封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞后,请

先打开外包装,及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致,并仔细查看培养瓶是否有

破损或漏液等异常情况,如有破损或漏液等异常情况,请立即拍照,并联系工作人员处理。

2、处理

(1)75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。

(2)待酒精挥发完*,在显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(40x,100x,200x,

各三张)。前三天的细胞照片为重要的售后依据,不提供照片默认收到时细胞状态良好。

(3)不要打开培养瓶盖,将细胞放入培养箱中静置 2-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。

(4)查看细胞说明书,按照细胞说明书中描述的培养参数进行常规细胞培养操作(见“细胞说明书"第一

页)。  贴壁细胞

 未超过 80%汇合度时,将培养瓶中的完*培养基收集至 50mL 离心管中(对比培养使用),留大约

7mL 完*培养基在细胞培养瓶中,放入培养箱中继续培养。

 超过 80%汇合度时,将培养瓶中的完*培养基收集至 50mL 离心管中(对比培养使用),根据情况进

行传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。首*传代,建议 1:2 进行传代(分两个 T25)。传代时

建议一瓶用原瓶中的完*培养基,另外一瓶用自行配制的完*培养基,二者进行对比培养。

 若细胞贴壁不牢,在运输过程中容易发生细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶中所有培养液收集至

50mL 离心管,1000rpm 离心 5 分钟,收集上清(对比培养使用),往细胞沉淀中加入胰,酶 1-2mL,

轻轻吹打,重悬,消化 1-2 分钟后,加入 5mL 完*培养基终止消化。1000rpm 离心 5 分钟,弃去上

清,加入 1-2mL 完*培养基重悬细胞。然后按 1:2 的比例进行传代(分两个 T25),补充完*培养基

至 5-8mL/瓶,放入细胞培养箱中培养。 二、冻存细胞收到后处理

1、观察

收到细胞后,请检查外包装情况和箱内是否还有干冰。如有外包装破损、干冰已完*挥发等问题,请立即

拍照,并联系工作人员处理。

2、处理

(1)迅速将细胞取出转移至液氮保存,建议尽早复苏。

(2)复苏第一管如有细胞活性问题,请对细胞进行不同倍数拍照(40x,100x,200x,各三张),并及时

联系工作人员处理,后续会有技术人员与您沟通指导后再复苏第二管。特别说明:未与我方联系擅自复苏

第二管,出现问题不予售后。

三、细胞复苏

(1)确认水浴锅已升温至 37℃,取 5mL 预热的完*培养基于 15mL 离心管中待用。

(2)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中

无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁。

(3)将冻存管中的细胞转移至含 5mL 完*培养基的 15mL 离心管中,1000rpm 离心 5 分钟。

(4)弃尽上清,细胞沉淀用 1-2mL 完*培养基重悬,接种至 T25 培养瓶,补充完*培养基至 5-8mL/瓶,

放入细胞培养箱中培养。

(5)贴壁 5 小时以上或次日,更换新鲜的完*培养基继续培养。 四、细胞传代

(1)细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。首先,弃去培养上清,用 PBS 漂洗细胞 1-2 次。

(2)加入 1-2mL 消化液,置于培养箱中消化适当时间,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部

分变圆并脱落,即消化完*,将细胞迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入与消化液等体积的含 10%血

清的完*培养基终止消化。

(3)轻轻吹打细胞,待细胞完*脱落后转移至 15mL 离心管,1000rpm 离心 5 分钟。

(4)弃去上清液,然后按推荐比例进行分瓶传代(收到细胞后首*进行传代,推荐 1:2 比例进行分瓶传

代),补充完*培养基至 5-8mL/瓶。

(5)放入细胞培养箱中继续培养。 五、细胞冻存

(1)细胞生长状态良好,细胞密度达 80%-90%,即可进行细胞冻存。首先,弃去培养上清,用 PBS 漂洗

细胞 1-2 次。

(2)加入 1-2mL 消化液,置于培养箱中消化适当时间,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部

分变圆并脱落,即消化完*,将细胞迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入与消化液等体积的含 10%血

清的完*培养基终止消化。

(3)轻轻吹打细胞,待细胞完*脱落后转移至 15mL 离心管,1000rpm 离心 5 分钟。

(4)弃去上清液,往细胞沉淀中加入 1mL/支的立谱沃无血清冻存液(货号:PZ110R),混匀后加入冻存

管中,并做好标记。

(5)将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可(如果追求更理想的细胞复苏率,也可选择使用程序降温盒),

24 小时后转入液氮中长期储存,并做好储存记录。




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