WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)
CatalogNumber:ED510
01/产品概述:
立谱沃生物的WesternBlot快速转膜液(20X)ED510,即WesternBlotRapidTransferBuffer(20X),是一种20倍浓缩的安全无毒害的用于WesternBlot实验的快速湿转缓冲液。本产品采用全新的快速转印配方,15-30min即可高效、快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。本产品为20倍浓缩(20X)溶液,使用前需要用适当水和乙醇稀释至1X。配制过程中,可用无水乙醇替代甲醇,无需使用剧毒的甲醇等试剂,安全无毒害。转膜全程产热小,无需外置冰浴。
02/产品组分
组分 | ED510 |
Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) | 500 mL |
03/保存条件:常温运输。室温干燥处保存,有效期12个月。
04/Western Blot快速转膜液(20X) ED510产品特点
1.转印快速、高效——500mA恒流转膜15-20分钟或400mA恒流转膜约20-30分钟,即可将聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白转移至印迹膜上,转膜效果好。
2.无需外置冰浴,仅使用内置冰盒即可——转膜过程产热非常小,无需外置冰浴,减少蛋白损失。相同的条件下使用传统的转膜液更容易导致过度发热,而在发热程度相似的情况下传统转膜液需要转膜更长时间。
3.使用安全——可用无水乙醇替代甲醇,选择灵活,可避免使用有毒的甲醇等试剂。
05/适用范围
WesternBlot快速转膜液(20X)适用于WesternBlot湿转法转膜。兼容各种常见凝胶,例如Laemmli胶、预制胶、FastPAGE、Bis-Tris胶等。
06/使用说明
一、WesternBlot快速转膜液(1X)1000mL的配制方法:
取WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)50mL加入850mL超纯水中,加入100mL无水甲醇(或无水乙醇),混匀,4℃保存备用。
二、Western Blot快速转膜液(20X) ED510参考转膜条件:
根据实验条件及仪器的不同,转膜条件会有差别。通常条件下,转膜电流可设置为电泳仪允许的最大电流。具体转膜条件可根据电泳仪电流限定、凝胶厚度、分离胶浓度、目的蛋白分子量做出适当调整。参考转膜条件如下:
1.梯度胶
浓度4%~15%,厚度0.75mm,恒流400mA,30min以内所有条带均可完成转膜。
2.普通PAGE胶
转膜效率与分离胶浓度及厚度有关,对于各浓度1.0mm凝胶,采用恒流400mA,按如下时长即可将150kDa以下蛋白转印*,若蛋白分子量大于150kDa,需延长转膜时间5-10min。
分离胶浓度 | 6% | 7.5% | 10% | 12.5% |
推荐转膜时间 | 20 min | 25 min | 30 min | 35 min |
ØPAGE胶厚度越厚,转膜效率越低。对于厚度1.5mm的凝胶,可将上表推荐的转膜时间相应延长5-10min。
07/WesternBlot快速转膜液(20X)ED510注意事项
1.PVDF膜使用前需用无水甲醇润湿30秒以上进行活化。
2.转膜液稀释为1x后请尽快使用,应避免长时间存放于室温,短期内保存建议放置于4℃冰箱。
3.转膜时,如果出现报错而停止,需要根据情况查看是否是电压或电流过载、转膜液过多或过少、转膜槽短路或断路等异常情况。
4.回收的转膜液可重复使用1-2次,但为取得更好的转膜效果,不建议多次重复使用,以免影响转膜效率。
5.为了您的健康安全,请规范操作,穿戴实验服与手套开展实验。
6.本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及治疗。
08/其他相关产品
产品名称 | 货号 | 规格 |
Western Blot CBB Protein Safe Stain Solution (Decolorization Free, 1X) | ED410-1 | 100 mL |
ED410-5 | 500 mL | |
Western Blot Rapid Blocking Buffer (Protein Free, 1X) | ED610-1 | 100 mL |
ED610-5 | 500 mL | |
Western Blot Stripping Buffer (1X) | ED710-1 | 100 mL |
ED710-5 | 500 mL | |
Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer (1X) | ED810-1 | 100 mL |
ED810-5 | 500 mL | |
Western Blot Ultra Sensitive ECL Chemiluminescent Substrate Kit | ED910-1 | 100 mL |
ED910-5 | 500 mL |