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一文带您详细了解核酸转染试剂

更新时间:2023-09-11 点击量:630
  核酸转染试剂是用于将外源核酸引入细胞内的重要实验方法。通过该试剂,研究人员可以将外源核酸(如质粒DNA、RNA等)转染到目标细胞内,从而实现基因功能研究、基因治疗和基因工程等多个领域的研究。利用转染试剂与外源核酸的相互作用,使其形成一个稳定的复合物,进而可以被细胞摄入。一般来说,可以分为两大类:脂质体转染试剂和阳离子转染试剂。
 
  脂质体转染试剂采用了脂质体作为载体,脂质体由磷脂和辅助物质如胆固醇、PEG等组成。当脂质体与核酸混合后,可以形成一个核酸-脂质体复合物。这一复合物能够与细胞膜相互结合,并且由于其与细胞膜的相似性,复合物可以被细胞摄入。一旦复合物进入细胞内,脂质体会与细胞膜融合,释放出核酸分子,使之进入细胞质。这种方式适用于多种细胞类型,但对细胞毒性较高,转染效率一般较低。
 
  阳离子转染试剂则是利用带正电荷的有机阳离子或无机阳离子与核酸相互作用,形成一个纳米复合物。这个复合物具有良好的细胞摄入能力,因为细胞膜通常是带负电荷的,与阳离子形成相互作用后,复合物能够通过电荷吸引力进入细胞内。与脂质体转染试剂相比,阳离子转染试剂的转染效率并不高,但优点在于转染过程中细胞毒性较低。
  核酸转染试剂
  核酸转染试剂的操作使用步骤:
 
  1.实验前,准备好所需的材料,包括细胞培养基、细胞培养器具等。
 
  2.将细胞培养至适当的浓度,并将其分配到培养皿中。
 
  3.准备核酸:将所需的DNA或RNA溶解在无菌的介质中,并温和震荡混合。注意避免气泡的产生。
 
  4.向核酸样品中加入适量的染试剂,并进行轻柔混合,然后静置在室温下短暂地孵育。
 
  5.将转染试剂-核酸混合物缓慢地滴加到培养皿中,并轻轻摇晃培养皿,确保混合物均匀分布。
 
  6.放置细胞在适当的条件下,进行培养和表达。