当前位置:网站首页技术文章 > LeapWal 无血清细胞冻存液

LeapWal 无血清细胞冻存液

发布时间:2022-06-17 点击量:275

Cell Freezing Medium (1x)

Catalog Number:PZ110R


01/产品概述


细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术,是细胞长期保存的重要手段。细胞冻存液通过冷冻保护剂在冻存过程中对细胞进行保护,以减少或防止冷冻冰晶对细胞造成的损伤。


LeapWal 无血清细胞冻存液 Cell Freezing Medium (1x) 是立谱沃生物自主研发的一款无血清、无需程序降温的细胞冻存液,广泛适用于多种哺乳动物细胞的冻存。该冻存液特别优化的配方含有双重保护细胞的成份,从细胞内和细胞外同时保护细胞免受冻存时冰晶的损伤,大大提高了细胞的复苏率和活力,可用于细胞长期保存。该产品配方成分明确,不含动物来源性蛋白,不含血清,可减少各类细菌、病毒和支原体等污染,保证冻存细胞的安全。


与传统冻存液相比,本产品不仅可以避免使用血清,降低血清中未知成分和病毒等感染物质给冻存带来的影响与风险,同时,可省去繁琐费时的程序降温过程,细胞可重悬于本产品后直接置于-80℃冰箱长期保存,或次日转移到液氮完成整个冻存过程。



02/产品组分

截屏2022-06-17 22.32.29.png



03/保存条件


冰袋(wet ice)运输。4℃保存,有效期6个月。若长期不用,可-30℃至-10℃保存,有效期24个月。



04/产品特点

1. 即用型细胞冻存液,无需程序降温,直接冻存于-80℃冰箱,长期保存(>5年)

2. 安全性高,无动物源性蛋白,不含血清,病毒、病菌和支原体等污染可能性低

3. 冻存细胞复苏率高达90% 以上,细胞活力好

4. 成分明确,极大降低批次间差异



05/实验流程概要

6.png



06/实验步骤


一:细胞冻存步骤

1. 选择处于对数生长期的细胞,按照常规方法收集贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中。

2. 1000 rpm-2000 rpm,离心5分钟,收集培养细胞沉淀,弃上清液。

3. 加入适量4℃预冷的LeapWal Cell Freezing Medium (1x) 重悬细胞,制成细胞悬液。

Ø 按照细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存液的量,推荐冻存密度:1x106至5x106cells/mL。

4. 将细胞悬液分装至已标记的冻存管中,建议每管1mL或1.5mL。

5. 直接将细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。如果想放入液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少12小时,方可移至液氮罐中长期保存。


二:冻存细胞复苏步骤

1. 在15 mL离心管中加入5-10 mL平衡至室温的*培养基。

2. 从-80℃冰箱/液氮中取出冻存的细胞,立即放入37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中,迅速解冻。

3. 将冻存管中的细胞悬液逐滴转移至预先准备好的含*培养基的离心管中,1000 rpm-1500 rpm,离心5分钟,收集细胞沉淀,弃上清(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去)。

4. 加入适量平衡至室温的*培养基重悬细胞,接种到事先准备好的培养容器中,轻轻摇晃培养容器,使细胞分布均匀。

5. 镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。培养5-24h后,观察细胞状态,可视情况更换新鲜细胞培养液。



07/适用范围


广泛适用于多种哺乳动物细胞的冻存。无需程序降温,-80℃可长期保存(>5年),细胞存活率在90% 以上。



08/质量控制


LeapWal 无血清细胞冻存液均已通过严格的内毒素、渗透压、pH测试和无菌检测(细菌、真菌和支原体检测)。



09/注意事项


1. 若长期不用,本产品可-30℃至-10℃保存,再次使用时,请在2-8℃或室温(22-25℃,不超过4小时)融化LeapWal Cell Freezing Medium,避免反复冻融;

2. 使用LeapWal Cell Freezing Medium冻存细胞后,应尽量减少冻存细胞在外存放时间,尽快移入-80℃超低温冰箱长期保存;

3. LeapWal Cell Freezing Medium含有DMSO,部分对DMSO敏感的细胞、淋巴细胞或干细胞冻存,建议使用本产品对其进行试验性冻存、复苏、培养,确认性能后再进行正式冻存;

4. 该产品在室温条件下放置的时间不宜过长,以免影响冻存效率;

5. 免责声明: 本公司将不为任何不正当使用此产品所发生的意外负责;

6. 为了您的健康安全,请规范操作,穿戴实验服与手套开展实验;

7. 本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及治疗。



10/实验案例分析


1. 选择处于对数生长期的四种细胞,按照常规方法收集细胞于离心管中。

2. 1000 rpm,离心5分钟,收集培养细胞沉淀,弃上清液。

3. 加入适量4℃预冷的LeapWal Cell Freezing Medium 、T公司冻存液、X公司冻存液分别重悬细胞,制成细胞悬液。冻存密度为1x106 cells/mL。

4. 将细胞悬液分装至已标记的冻存管中,每管1mL,放入-80℃冰箱中,冷冻保存。

5. 冻存6个月后,进行细胞复苏,对复苏后的细胞进行台盼蓝染色,统计细胞存活率。


7.png

图2: 细胞冻存6个月后复苏,对复苏后的细胞进行台盼蓝染色,统计细胞存活率



11/其他相关产品

截屏2022-06-17 22.35.23.png














在线咨询
咨询热线

18478886838

[关闭]