1.转染前一天铺HEK293细胞，培养基为含10%FBS的DMEM培养基，以6wellplate为例，细胞数目约为0.5x106cells。
2.在无菌管中加入目的DNA质粒(1-2ug)及无血清的DMEM或者Opti-MEM。
3.在无菌管中加入无血清的DMEM或者VGF转染试剂4-10ug。
4.将2和3步中的溶液混合，室温放置20-30min。
5.将4步所得混合液逐滴加入至6wellplate中。
6.转染48h后，吸弃培养基，加入终浓度为1-10ug/mlPLM-Puromycin试剂的培养基2ml。
7.再培养48h后，观察细胞状态，不含嘌呤霉素的细胞会飘起死亡，转入含嘌呤霉素抗性质粒的细胞则贴壁生长。再次吸弃培养基，加入终浓度为1-10ug/mlPLM-Puromycin试剂的培养基2ml，继续杀死无嘌呤霉素抗性的细胞。
8.再培养48h，若细胞仍然贴壁生长且几乎长满，结果说明我们的目的质粒含有嘌呤霉素抗性基因，否则目的质粒不含嘌呤霉素抗性基因。
注意事项：筛选细胞时，细胞接种密度不能过大，以免影响筛选效率。当细胞密度比较大时，可加本试剂反复筛选，直至对照细胞死亡。建议的一般哺乳动物细胞选用的有效浓度范围为1-10μg/ml,使用前要做浓度筛选，选择合适的浓度。
