当前位置:网站首页产品展示试剂慢病毒 > LC110RLeapWal ViralStars 慢病毒浓缩试剂(5x)

LeapWal ViralStars 慢病毒浓缩试剂(5x)

简要描述:LeapWal ViralStars 慢病毒浓缩试剂(5x) LC110R是针对慢病毒富集而优化的聚合物材料,它提供了一种简单、快速、高效的慢病毒颗粒浓缩方法。使用本产品进行病毒浓缩后,病毒滴度可提高10-100倍,病毒回收率最高可达约90%,病毒损失少,并且病毒在浓缩过程中能保持病毒生物活性。整个实验过程可在 4 小时内快速完成,无需超速离心。

  • 产品型号:LC110R
  • 产品价格:1062¥
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-08-08
  • 访  问  量:471
详细说明:

品牌自营品牌货号LC110R
供货周期现货主要用途慢病毒浓缩
应用领域医疗卫生,生物产业,制药,综合100ml



ViralStars LC Lentivirus Concentration Solution(5x)

CatalogNumber:LC110R


  

01/产品概述


  基于人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的慢病毒载体是一种用于基因转移研究的载体。慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。在感染能力方面,慢病毒载体可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞。对于一些较难转染的细胞,如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使用慢病毒载体能大大提高目的基因或目的shRNA的转导效率,且目的基因或目的shRNA整合到宿主细胞基因组的几率大大增加,能够比较方便快捷地实现目的基因或目的shRNA的长期、稳定表达。在体外实验及体内实验的研究中,慢病毒己经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一,并且正在获得越来越广泛的应用。

  LeapWal ViralStars 慢病毒浓缩试剂(5x)是针对慢病毒富集而优化的聚合物材料,它提供了一种简单、快速、高效的慢病毒颗粒浓缩方法。只需将慢病毒上清液与慢病毒浓缩试剂按比例混合,短时间孵育,采用标准离心机进行离心即可得到慢病毒颗粒沉淀。超滤、超速离心法等病毒浓缩法,操作时间长,步骤繁琐,且通常会有细胞碎片和血清蛋白等的污染,病毒纯度低。使用本产品进行病毒浓缩后,病毒滴度可提高10-100倍,病毒回收率最高可达约90%,病毒损失少,并且病毒在浓缩过程中能保持病毒生物活性。整个实验过程可在4小时内快速完成,无需超速离心即可获得出色的回收效率。



02/产品组分


截屏2022-06-18 12.50.02.png

截屏2022-06-18 12.50.02.png


03/保存条件

冰袋(wetice)运输。4℃保存,有效期12个月。



04/产品特点


  简单快速——操作简单,无需超速离心,确保活性,实验耗时不超过4小时

  浓缩效果优——病毒滴度可浓缩10-100倍以上(TransductionUnits/mL)

  回收效率高——慢病毒回收效率高达90%以上

  应用范围广——适用于所有类型的慢病毒颗粒



05/实验流程概要


慢病毒浓缩试剂 示意图.pptx_01.png


06/实验步骤


  1.将含有慢病毒颗粒的培养基转移至无菌容器中,300xg离心10分钟以除去细胞碎片。

  Ø为保证病毒活性,浓缩前的病毒上清液应尽量选择新鲜收集的病毒原液。

  2.使用0.22μm过滤器过滤上清液至无菌容器中。

  Ø如果使用滤膜过滤,推荐使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜,不推荐使用硝酸纤维素膜(NC)。

  3.向每4体积含慢病毒的上清液中加入1体积慢病毒浓缩试剂(5x),使慢病毒浓缩试剂(5x)稀释为工作浓度(1x)。

  4.将上述混合物于4℃摇床中慢速孵育3小时或过夜。

  Ø慢病毒颗粒在4℃可稳定长达4天。

  5.将混合物4℃4000xg离心25分钟。离心后,慢病毒颗粒可能在容器底部显示为米色或白色沉淀。

  6.小心弃去上清液,4℃4000xg离心5分钟,再次弃尽残余液体,应尽量避免吸走沉淀物,该沉淀物即为慢病毒颗粒。

  7.用初始体积(原上清液体积)1/10-1/100预冷的慢病毒保存液重悬病毒颗粒,使用移液器小心吹打,重悬慢病毒颗粒。

  Ø重悬病毒沉淀时,吹打操作要轻柔,可选择慢病毒保存液(LS110R)、*培养基或FBS重悬慢病毒。

  8.小体积分装慢病毒,储存于-80℃冰箱或液氮中,留取少量病毒测定滴度。

  Ø应尽量避免慢病毒反复冻融,否则会降低病毒滴度。



07/适用范围


  LeapWal ViralStars 慢病毒浓缩试剂(5x)适用于任何慢病毒颗粒的浓缩方法。



08/注意事项


  1.为了您的健康安全,请规范操作,穿戴实验服与手套开展实验;

  2.所有慢病毒操作均需在生物安全柜(BSL2级)中进行;

  3.本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及治疗。



09/实验案例分析


  1.使用10cm细胞培养皿培养ViralStars Lentivirus Packaging Cell Line(CL110001),待细胞密度为60-70%左右开始包装慢病毒;

  2.使用ViralStars LP Lentivirus Packaging Kit(LP110-10)进行慢病毒包装(阳性对照质粒含GFP绿色荧光蛋白基因),具体包装步骤按照说明书进行;

  3.准备目的细胞:将需感染的目的细胞293T以(1-3)x10^4的密度接种于96孔板内,次日即可进行慢病毒感染;

  4.待病毒包装48h后,收集慢病毒上清液约9mL,300xg离心10分钟以除去细胞碎片,使用0.22μm过滤器过滤上清液至无菌容器中。

  5.取1mL病毒上清液作为浓缩前对照1*,剩余8mL病毒上清液中加入2mL本产品进行慢病毒浓缩,具体慢病毒浓缩步骤按照说明书进行,保留1mL浓缩后应弃去的上清液作为对照2#,使用800μL *培养基轻轻重悬慢病毒颗粒,即可得到浓缩10倍的慢病毒;

  6.慢病毒感染目的细胞:将96孔板细胞弃去上清,每孔加入新鲜培养基100μL,Polybrene(LE110-01)0.2μL,浓缩后慢病毒100μL或对照1*(浓缩前慢病毒原液)100μL或对照2#(浓缩后应弃去的慢病毒上清液)100μL;

  7.继续培养细胞48h后,使用荧光显微镜观察绿色荧光强度,实验结果如图2所示。

8.png

8.png图2: 慢病毒感染目的细胞293T观察GFP表达情况。(左)浓缩10x慢病毒,(中)对照1*(浓缩前慢病毒原液),(右)对照2#(浓缩后应弃去的慢病毒上清液)。


10/其他相关产品


产品名称

货号

规格

ViralStarsTM

Lentivirus Packaging Cell Line

CL110001

3-5x106个细胞/

ViralStarsTM LP

Lentivirus Packaging Kit

LP110-10

10 T

LP110-20

20 T

LP110-40

40 T

Polybrene (10 mg/mL)

LE110-01

0.5 mL

LE110-05

0.5 mL x 5

Puromycin (10 mg/mL)

PS610-01

1 mL

PS610-05

1 mL x 5



 

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

上一篇:没有了

下一篇:30415LeapWal 1.5mL 微量离心管

在线咨询
咨询热线

18478886838

[关闭]