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基因过表达稳转细胞株技术背景
研究某个基因的功能常用的手段是在宿主细胞中过表达(over expression)或者通过RNAi 敲减(knock-down)该基因。基因过表达是指通过在细胞内提高特定基因的表达水平,从而实现基因的功能增强(gain of function)。基因过表达作为一种传统的分子生物学技术至今依然在生物学研究中发挥着重要作用,常规手段有瞬时转染和筛选稳定细胞株。
筛选出该基因的过表达稳定细胞株会给您后续实验带来极大的便利,让实验结果具有高度的可重复性。有了稳定细胞株,后期的Co-IP、Pull-Down、亚细胞定位、表型分析等实验都会变得非常便利。
慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组,进行长时间的稳定表达。构建稳定细胞株的基本原理就是利用慢病毒的特性,将外源DNA克隆到具有某种抗性的慢病毒载体中,通过包装慢病毒并感染目的细胞,慢病毒载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选,就可以得到稳定表达目的蛋白的细胞株,适合在各类细胞中稳定过量表达不同大小的外源基因。
立谱沃生物“基因过表达稳转细胞株"技术服务介绍
立谱沃生物建立了一套成熟稳定的慢病毒包装体系,针对多种不同细胞类型(包括难转染细胞),建立了标准的转基因技术服务体系,为您提供基因过表达稳转细胞株的构建服务。您只需提供目的基因和需要构建的细胞系,我们将按照您的要求完成目的基因过表达细胞株的构建和检测,为您提供高质量的基因过表达稳转细胞株。
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